高壓蒸汽滅菌是生物實驗常用的滅菌方法，根據容量大小不同可分為手提式、立式、臥式三種。高壓滅菌鍋廣泛應用于各大專院校、醫療 衛生、食品化工、生物科研等單位對器械、敷料、器皿、藥液、培養基等物品的滅菌處理。

　　高壓蒸汽滅菌具有滅菌速度快、效果可靠、溫度高、穿透力強等優點， 使用不當，可導致滅菌的失敗。在滅菌中應注意的幾點:

　　一、消毒物品的初步處理。凡接觸過病原微生物的醫療器械、被單、衣物等均應先用化學消毒劑進行消毒， 然后按照常規清洗。特別是傳染病房用后的各類物品， 要嚴格把關， 先嚴密消毒后， 再清洗、消毒。常規清洗時，先用洗滌劑溶液浸泡擦洗，去除物品上的油污， 血垢等污物， 然后用流水沖凈。有軸節、齒槽和縫隙等器械和其它物品，應盡可能張開或拆卸， 進行*洗刷。洗滌后的物品應擦干，按各臨床需要分類包裝， 以免再污染。清除污染前、后物品的盛器和運送工具應嚴格區分，并有明顯標志， 以防交叉感染。

　　二、消毒物品的包裝和容器要合適。包裝采用雙層包布白色棉布，新包布應先洗滌去漿后再使用。物品包裝用線繩捆扎， 以不松動散開為宜，不宜過緊。使用容器盛裝時，選用既可阻擋外界微生物侵入， 又有較好的蒸汽穿透性。如特制的注射器滅菌盒、裝敷料的貯槽等。民用鋁盒因蒸汽難以進入， 而盒內的空氣又不易排出，按常規滅菌常不能達到滅菌效果。試驗對比表明它的污染率大大高于醫用鋁盒。所以不能使用民用鋁盒裝注射器或器械滅菌。

　　三、消毒物品裝放應合理。消毒物品過多或放置不當都可影響滅菌效果。消毒鍋內物品不能過擠，不超過鍋內容量。盡量將同類物品裝一鍋內滅菌。若有不同類物品裝放一起，應以量難達到滅菌物品所需的溫度和時間為準。物品裝放時，上下左右均應交叉錯開，留出縫隙， 使蒸汽容易穿透。大消毒包應立著放上層, 小包放下層大搪瓷盒和貯槽也應立著放布類和金屬類物品同時滅菌，應將金屬類物品包放在下層，使兩者受熱基本一致，并防金屬物品滅菌中產生的冷凝水弄濕包布。

　　四、排盡空氣。使用高壓蒸汽消毒鍋時， 最關鍵的是將鍋內空氣排盡。如鍋內有空氣，則氣壓針所指的壓強不是飽和蒸汽產生的壓強。相同的壓強， 混有空氣的蒸汽其溫度低于飽和蒸汽所產生的溫度。

　　五、合理計算滅菌時間。滅菌時間包括:①穿透時間，從鍋內達到滅菌溫度開始計算時間，到鍋內最難達到的部位也達到此溫度的時間;②維持時間，即殺滅微生物所需時間， 一般以殺滅嗜熱脂肪桿菌芽胞所需時間來表示;③安全時間，為使滅菌得到確切保證所需增加的時間。一般為熱死亡時間的一半， 其長短視消毒物品而定。對易導熱的金屬器材的滅菌，不需要安全時間。在滅菌時間內， 要注意壓力表，及時間調節進氣量，以保持在的壓力， 維持到滅菌時間為止。在滅菌過程中， 如有壓力、溫度下降， 應重新升溫升壓，重新計時。

　　六、滅菌后。要求消毒物品干燥后，檢查指示劑達到滅菌要求即可出鍋。取無菌物品時， 要嚴格無菌操作，開蓋物品先將蓋蓋好，貯槽關閉好通氣孔。同時應分類放置， 順序發放取用。超過有效期，炎熱潮濕季節一般不超過七天。

　　七、防止超熱蒸汽。超熱蒸汽溫度雖高，但象空氣一樣，遇到消毒物品時不能凝成水，不能釋放潛熱， 所以對滅菌不利。防止超熱的辦法是使用外源蒸汽滅器時，不要使夾層的溫度高于消毒室的溫度，兩者應相近不要使壓力過高的蒸汽進入消毒室內;滅菌時不要用壓力高的蒸汽加熱到要求溫度，然后再降壓力。

　　八、注意安全。每次滅菌前應檢查滅菌器是否處于良好的工作狀態，尤其是安全閥是否良好。消毒后減壓不可過猛過快。應等壓力表歸回"0"位時，才可以打開鍋門。如果消毒鍋內是瓶裝溶液，且突然開鍋， 則玻璃驟然遇到冷空氣易發生爆裂，必須注意如果突然把鍋門開得太大，冷空氣大量進入，易使包布周圍蒸汽凝成水點而堵塞包布孔眼, 阻礙包布內蒸汽排出，而使物品潮濕。

　　九、不能使用高壓蒸汽滅菌器消毒任何有破壞性材料和含堿金屬成份的物質。消毒這些物品將會導致爆炸或腐蝕內膽和內部管道，以及破壞墊圈。